邁爾斯（沙梅克·摩爾 配音）的父親是一位一板一眼的警官，而他的母親則是一名工作勤奮的護士。慈愛的父母對於孩子的成就非常自豪，也希望他能夠融入新加入的這所優秀的學校，在這裡取得成功。然而邁爾斯的生活因為一次意外變得更加復雜。他被一隻放射性蜘蛛咬傷，並因此獲得了毒液沖擊、偽裝隱藏、蜘蛛爬行、超凡聽力、蜘蛛感應等一系列超能力。與此同時，這座城市裡最臭名昭著的犯罪頭目金並（列維·施瑞博爾 配音）已經建立起一臺高度隱秘的超級對撞機，這臺對撞機開啟了通往其他宇宙的時空通道，來自其他宇宙、不同版本的蜘蛛俠（包括中年彼得·帕克、女蜘蛛俠格溫、暗影蜘蛛俠、蜘豬俠和潘妮·帕克）也來到了邁爾斯所在的世界。在這些新老角色的幫助下，邁爾斯慢慢學習、逐漸接受挑戰，也學會了作為一名超級英雄所要承擔的責任。他最終意識到，任何人都可以戴上超級英雄的面具，為正義而戰……
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